丙型肝炎病毒NS5A基因真核表达载体的构建

• 作者: 姜艳芳 牛俊奇 胡玉琳 苏秀芬
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 真核表达载体 NS5A基因 肝炎病毒,丙型
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 44-46
• 页数: 3页
• 分类号: R5
• 字数: 2106字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-587X.2007.01.012

摘要

目的:构建HCV NS5A/pCI-neo真核表达载体,转染Huh-7细胞系,为体外高效表达NS5A蛋白奠定基础.方法:用PCR方法从带有丙型肝炎病毒NS5A基因的pC DNA 3.1(+)/HCV NS345质粒中扩增出HCV NS5A基因,然后TA克隆于pGEM-T载体中,转化大肠杆菌JM109.阳性克隆经测序鉴定,再经双酶切消化后插入真核表达载体pCI-neo上,经酶切鉴定与测序证实.结果:用PCR方法扩增出HCV NS5A基因全序列,因其cDNA的G+C含量高直接测序末成功,后经TA克隆,筛选得到的阳性克隆经测序鉴定,与设计的HCV NS5A基因序列完全一致.经酶切连接并成功插入pCI-neo上.结论:成功构建了高效表达丙型肝炎病毒NS5A基因的pCI-neo真核表达载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡玉琳	吉林大学第一医院传染科	36	127	7.0	9.0
2	牛俊奇	吉林大学第一医院传染科	189	1139	15.0	27.0
3	姜艳芳	吉林大学第一医院传染科	59	187	6.0	10.0
4	苏秀芬	吉林大学第一医院传染科	9	29	3.0	5.0