丙型肝炎病毒NS5A基因真核表达载体的构建及其在HL-7702细胞中的高效表达

• 作者: 姜艳芳 牛俊奇 王峰 苏秀芬
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 肝炎病毒 NS5A蛋白 真核细胞表达
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 技术交流
• 页码范围: 1092-1095
• 页数: 4页
• 分类号: R512.63
• 语种: 中文

摘要

目的:构建丙型肝炎病毒(HCV)NS5A基因的真核表达载体,并在正常人肝细胞株(HL-7702细胞)中进行表达,为今后研究HCV NS5A蛋白功能奠定基础.方法:从含HCV NS345序列的重组质粒pCDNA3.1(+)/NS345中扩增出HCV NS5A基因片段,构建pCI-neo/NS5A重组表达质粒.用脂质体将其转染HL-7702细胞,通过Western blotting印迹法鉴定NS5A蛋白.结果:用PCR方法扩增的HCV NS5A基因全长1 344 bp,与PGEM-T重组,测序证实所克隆的NSSA基因片段大小正确;成功地构建pCI-neo/NS5A重组表达质粒,瞬时转染HL-7702细胞表达NS5A蛋白,Western blotting印迹法显示其相对分子质量约为56 000.结论:HCV NS5A的真核表达载体pCI-neo/NS5A在HL-7702细胞中能有效表达NS5A蛋白,NS5A蛋白可导致病毒复制、肝细胞癌发生,且NS5A区为IFN敏感性决定区.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	牛俊奇	吉林大学第一医院感染症科	189	1139	15.0	27.0
2	王峰	吉林大学第一医院感染症科	97	414	12.0	14.0
3	姜艳芳	吉林大学第一医院感染症科	59	187	6.0	10.0
4	苏秀芬	吉林大学第一医院感染症科	9	29	3.0	5.0