A7-B7二硫键缺失对胰岛素原重折叠及结构的影响

• 作者: 刘颖 唐建国
• 来源期刊: 生物化学与生物物理学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 二硫键 体外重折叠 胰岛素原 二级结构
• 年，卷（期）: 2003,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 122-126
• 页数: 5页
• 分类号: Q5
• 语种: 英文

摘要

为研究A7-B7二硫键在胰岛素原结构和折叠中的作用, 构建了A7-B7二硫键缺失的胰岛素原突变体, 研究了其与野生型胰岛素原在体外重折叠产率、自由巯基氧化速度、CD谱、受体及抗体结合活性, 以及对胰蛋白酶酶切敏感性的差别. 结果表明, A7-B7二硫键缺失可导致胰岛素原α-螺旋明显减少以及对胰蛋白酶的酶切敏感性显著增加, 其对胰岛素原结构的影响主要导致了受体结合活性的大幅度降低. 突变体在体外重折叠1 h后巯基氧化速率较野生型明显减慢, 但其最终折叠产率与野生型相当. 由此提出一个胰岛素原折叠的可能途径, 即A链链内二硫键最先形成, 然后是两对链间二硫键. 且A20-B19二硫键比A7-B7二硫键很可能先形成, 在折叠中更重要.