摘要:
目的建立解脲脲原体(Ureaplasma urealyticum,Uu)的分群和四环素耐药PCR检测方法.方法1.根据Uu的多带抗原(multi-banded antigen,MBA)基因序列自行设计引物(P15'-ATT,TGC,AAT,CTT,TAT,ATG,TT;P25'-TTC,AGC,TGA,TGT,AAG,TGC,AGC,ATT,AAA,T),并建立分群PCR反应体系.2.根据Tet M基因序列自行设计引物(P15'-TTA,TCA,ACG,GTT,TAT,CAG,G;P25'-GCT,ATA,TAT,GCA,AGA,CG),并建立四环素耐药反应体系.结果1.MBA基因PCR能将Uu14个血清型正确分为二个生物群,其中生物一群(1、3、6、14等4个血清型)出现404bp的产物带,生物二群(2、4、5、7、8、9、10、13、12、13等10个血清型)出现448bp的产物带.60株Uu临床分离株经MBA基因PCR检测,生物一群53例、生物二群6例、生物一/二群同时存在1例.2.Uu典型株14个血清型Tet M基因PCR扩增的不能出现任何条带;60株Uu临床分离株经Tet M基因PCR检测41例出现目的条带.结论PCR法进行Uu生物分群和四环素耐药检测简单、快速,为相关研究提供了手段.