牛催乳素基因组全序列的克隆及在真核细胞中的表达

• 作者: 曹新 曾溢滔
• 来源期刊: 南京医科大学学报(自然科学版)
• 学科: 医学
• 关键词: 催乳素 长距离PCR COS-7细胞 牛
• 年，卷（期）: 2003,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 112-115
• 页数: 4页
• 分类号: R335+.1|Q78
• 字数: 3777字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-4368.2003.02.007

摘要

目的:构建牛催乳素(bPRL)为目的基因转基因动物-乳腺生物反应器.方法:采用长距离PCR技术,首次从正常牛外周血细胞中克隆到全长9 388 bp的bPRL基因组序列,利用亚克隆的方法将bPRL基因组DNA克隆到真核表达载体pcD-NA3.1(+)上,构建出pcDNA3.1(+)/bPRL的重组表达载体,通过脂质体转染至非洲绿毛猴肾细胞株(COS-7),逆转录-PCR得到长度为804 bp扩增片段.结果:序列测定bPRL基因包括全部5个外显子和4个内含子,5＇端854 bp的上游调控区以及3＇端69 bp的非翻译区(UTR).bPRL cDNA包含信号肽在内的全长序列.结论:克隆的bPRL基因组DNA序列在转录水平上具有生物学功能,在体外培养的真核细胞中能够进行正常表达,为进一步建立转基因动物-乳腺生物反应器莫定了坚实的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曾溢滔	上海市儿童医院上海医学遗传研究所	19	304	8.0	17.0
2	曹新	南京医科大学细胞生物学与医学遗传学系	61	324	10.0	15.0