m1AChR-G11和m4AChR-G16融合蛋白的建立、表达及几种配体的作用

• 作者: 张海鹏 李新鸣 温华 王娟 王海波 郭政东
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 受体,毒蕈碱 信号转导 配体 G蛋白
• 年，卷（期）: 2003,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1590-1595
• 页数: 6页
• 分类号: R363
• 字数: 5891字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2003.12.002

摘要

目的:通过Baculovirus-Sf9 cells系统制备m1AChR-G11融合蛋白和m4AChR-G16融合蛋白,检测几种配体对m1AChR与G11及m4AChR与G16间相互作用的影响,并以m1AChR-G11和m4AChR-g16融合蛋白为工具,筛选m1和m4受体的特异性配体.方法:两步PCR建立m1AChR-G11和m4AChR-G16融合DNA,并在Sf9细胞内表达.通过[3H]QNB和[35S]GTPγS结合实验检测m1AChR-G11融合蛋白和m4AChR-G16融合蛋白的药理学特性;通过[35S]GTPγS替代结合实验研究几种配体包括acetylcholine(ACh),pilocarpine(Pilo).4-hydroxy-2-butynyl-1-trimethylam-monium-m-chloro-carbanilatechloride(McN-A-343),tetrandrine,pirenzepine(PZ),alcuronium,atropine,R-(+)-hyoscyamine和gallamine对m1AChR-G11融合蛋白和m4AChR-G16融合蛋白作用的方式,并以这两种融合蛋白为模型筛选m1和m4受体的特异性配体.结果:m1AChR-G11融合蛋白和m4AChR-G16融合蛋白表达水平分别为(45.4±2.6)nmol/g protein和(47.0±1.6)nmol/g protein.不同配体使融合蛋白m1AChR-G11和m4AChR-G16中G11和G16与GDP的亲和力发生变化.结论:杆状病毒-Sf9细胞系统表达的m1AChR-G11融合蛋白和m4AChR-G16融合蛋白具备m受体配体结合特性和组分间的偶联能力.配体通过改变m1AChR-G11融合蛋白和m4ACh-G16融合蛋白中的G11和G16与GDP的亲和力活化这两种融合蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王娟	中国医科大学病理生理学教研室	31	167	8.0	11.0
2	张海鹏	中国医科大学病理生理学教研室	86	603	12.0	20.0
3	温华	中国医科大学附属第一医院呼吸内科	35	167	8.0	11.0
4	王海波	中国医科大学病理生理学教研室	18	52	4.0	6.0
5	郭政东	中国医科大学药理学教研室	24	107	6.0	10.0
6	李新鸣	中国医科大学病原生物学教研室	10	11	2.0	3.0