枯草杆菌6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶的分离纯化及部分性质研究

• 作者: 刘克武 刘祝君 喻东 国锦林 江琰 秦岭 莫宏春
• 来源期刊: 四川大学学报(自然科学版)
• 学科: 生物学
• 关键词: 枯草芽孢杆菌 6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶 分离纯化 性质
• 年，卷（期）: 2003,（5）
• 页码范围: 939-944
• 页数: 6页
• 分类号: Q841.1
• 字数: 3120字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0490-6756.2003.05.032

摘要

采用DEAE-Sepharose离子交换层析,Blue-Sepharose CL-6B特异结合层析和Sephadex G -200凝胶过滤技术,对枯草芽孢杆菌中的6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶进行了分离纯化.纯化倍数为112.3倍,比活为1.46 U/mg,回收率为8.2%.纯化酶液经聚丙烯酰胺凝胶电泳检验为单一带.测得全酶相对分子质量为107kD,具有两个分子量相同的亚基,亚基相对分子质量为51kD.最适pH值为8.0,最适温度为30℃,对热不稳定.以6-磷酸葡萄糖酸和NADP+为底物,其Km值分别为Km1(NADP+)=19.8μmol/L和K m2(6-GPA)=22.6 μmol/L.在5 mmol/L～50 mmol/L浓度范围内,Mg2+,Ca2+和Mn2+对酶有激活作用,Fe3+和Cu2+对酶有抑制作用,K+,Na+,Cl-,NO-3,SO-4对酶几乎没有影响.用PMSF,TNBS,NBS,DTT和BrAc对酶进行修饰,实验结果表明,丝氨酸、苏氨酸、赖氨酸和组氨酸残基可能是该酶活性中心的功能基团.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘克武	四川大学生命科学学院	64	914	18.0	26.0
2	秦岭	四川大学生命科学学院	12	137	5.0	11.0
3	江琰	四川大学生命科学学院	12	165	8.0	12.0
4	喻东	四川大学生命科学学院	31	579	13.0	23.0
5	莫宏春	四川大学生命科学学院	2	19	2.0	2.0
6	国锦林	四川大学生命科学学院	2	12	2.0	2.0
7	刘祝君	四川大学生命科学学院	1	5	1.0	1.0