抗C3d单抗制备及免疫金层析法的建立

• 作者: 刘根焰 柏兵 潘世扬 王俊宏 童明庆 蒋理 黄珮珺
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 单克隆抗体 补体 C3d 胶体金 免疫层析
• 年，卷（期）: 2003,（3）
• 所属期刊栏目: 研究生园地
• 页码范围: 159-161
• 页数: 3页
• 分类号: R446.6
• 字数: 3012字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-764X.2003.03.013

摘要

目的研制抗C3d单抗,建立免疫金层析法检测血浆补体片段C3d,判断补体活化情况.方法用菊糖-C3b作抗原,免疫Balb/c小鼠,并制备杂交瘤,以羊抗C3包被酶标反应板并结合C3d为检测板,筛选分泌抗C3d单抗的杂交瘤.利用protein G柱亲和层析提取抗C3d单抗IgG和C3d结合物,进行SDS-PAGE电泳,鉴定单抗的特异性.将抗C3d单抗标以胶体金,制备免疫金层析测试条.通过在免疫金中加未标金的抗C3d单抗(游离单抗)来调整试纸条的灵敏度,并测定C3d.结果 SDS-PAGE电泳图上,出现IgG的重链、轻链、及C3d 3个条带;金标记抗C3d单抗的试条(Ⅰ)测C3d的灵敏度在6～10 ng/ml,当加入0.1 μg/ml游离抗C3d单抗(Ⅱ)后,灵敏度为10～15 ng/ml.利用两种试条灵敏度的不同,对轻、中重型肝炎检测,结果轻型肝炎患者在纸条Ⅰ上阳性率为83.3%(25/30),纸条Ⅱ全为阴性,中重型肝炎者在纸条Ⅰ、Ⅱ的阳性率为100%(30/30).结论用本试验建立的免疫金层析法测定肝炎患者血浆C3d水平,可判断补体活化程度,辅助乙型肝炎轻、重分型.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	童明庆	南京医科大学第一附属医院临床检验中心	87	998	18.0	26.0
2	蒋理	南京医科大学第一附属医院临床检验中心	58	474	13.0	19.0
3	黄珮珺	南京医科大学第一附属医院临床检验中心	45	354	10.0	16.0
4	刘根焰	南京医科大学第一附属医院临床检验中心	56	408	13.0	17.0
5	潘世扬	南京医科大学第一附属医院临床检验中心	85	701	14.0	20.0
6	王俊宏	南京医科大学第一附属医院临床检验中心	21	157	7.0	12.0
7	柏兵	南京医科大学第一附属医院临床检验中心	4	60	2.0	4.0