抗肝癌sFv-TNF-α基因逆转录病毒包装细胞系的建立

• 作者: 刘彦仿 张惠中 沈万安 程虹
• 来源期刊: 西北国防医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝癌 单链双功能抗体 逆转录病毒表达载体 包装细胞系 基因转染
• 年，卷（期）: 2003,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 118-120
• 页数: 3页
• 分类号: R735.7
• 字数: 2129字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-8622.2003.02.014

摘要

目的:将分泌型抗肝癌单链双功能抗体基因(sFv-TNF-α)克隆至逆转录病毒载体pLXSN,包装并筛选具有高滴度感染性重组病毒产生细胞系.方法:用平-粘末端连接方法将sFv-TNF-α克隆至pLXSN, 磷酸钙共沉淀法转染PA317包装细胞并测定病毒滴度, 用PCR及免疫组化方法分析鉴定重组逆转录病毒细胞系.结果:成功构建了表达载体pLXSN-sFv-TNF-α,筛选出一株 cfu＞1×109*L-1的感染性重组病毒产生细胞系C22.结论:外源基因整合到转染细胞DNA中并表达,证实了重组病毒的活性及其转导靶细胞的可行性.