土耳其斯坦东毕吸虫成虫cDNA文库的构建

• 作者: 何国声 王春仁 邢继兰
• 来源期刊: 中国人兽共患病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 土耳其斯坦东毕吸虫 成虫 cDNA文库 构建
• 年，卷（期）: 2004,（7）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 637-639
• 页数: 3页
• 分类号: R383.2
• 字数: 2296字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2004.07.023

摘要

按照SMART cDNA文库构建试剂盒说明,以TRIZOL试剂提取的土耳其斯坦东毕吸虫成虫总RNA为模板,以含Sfi Ⅰ B酶切位点的oligo(dT)为引物反转录合成第一链cDNA,利用含Sfi Ⅰ A酶切位点的SMART核苷酸作为cDNA第一链在mRNA 5'端延伸出去的模板,采用LD-PCR技术以改良的oligo(dT)引物合成双链cDNA,经蛋白酶K和Sfi Ⅰ消化后,过CHROMA SPIN-400柱进行分级分离.双链cDNA与载体λTripEx2两臂连接,体外包装后构建成土耳其斯坦东毕吸虫成虫的cDNA噬菌体表达文库.经测定文库容量为6.38×106,文库扩增后的滴度为3.48×1010(Pfu/ml),PCR测定的重组率为92%.各项指标表明,我们成功的构建了高质量的cDNA文库,为进一步筛选、克隆保护性抗原基因奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何国声	中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所	44	251	9.0	12.0
2	邢继兰	中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所	3	8	2.0	2.0
3	王春仁		1	5	1.0	1.0