应用LD-PCR法构建大片吸虫成虫cDNA表达文库

• 作者: 张为宇 罗洪林 郑小龙 黄维义
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: LD-PCR 大片吸虫 cDNA表达文库
• 年，卷（期）: 2005,（11）
• 所属期刊栏目: 兽医
• 页码范围: 1183-1186
• 页数: 4页
• 分类号: S852.73|Q785
• 字数: 3485字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0366-6964.2005.11.016

摘要

为构建大片吸虫成虫cDNA表达文库,用Trizol试剂提取大片吸虫成虫总RNA,经反转录合成cDNA第一链,应用LD-PCR扩增方法,合成双链cDNA.用SfiⅠ内切酶修饰此双链cDNA,使形成两端分别带有SfiⅠ A和SfiⅠ B的黏性末端.经CHROMA SPIN-400柱纯化,收集400 bp以上的双链cDNA片段,将其连接于带有SfiⅠ A和SfiⅠ B末端的λTriplEx2噬菌体载体,经体外包装后,以XL1-Blue为受体菌构建cDNA表达文库.经测定,库容量为1.08×106PFU/mL,重组率为96.6%.扩增后的文库滴度为2.41×109PFU/mL,插入片段平均大小约为1 000 bp.这些结果表明已成功构建大片吸虫成虫cDNA表达文库,适合进一步筛选大片吸虫新基因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄维义	广西大学动物科技学院	117	736	14.0	20.0
2	张为宇	广西大学动物科技学院	50	250	9.0	12.0
3	罗洪林	广西大学动物科技学院	14	114	7.0	10.0
5	郑小龙	广西大学动物科技学院	9	33	4.0	4.0