大片吸虫成虫cDNA文库的构建和组织蛋白酶L1基因的克隆

• 作者: 何国声 岳城 徐梅倩 郭敏
• 来源期刊: 中国兽医寄生虫病
• 学科: 农学
• 关键词: 大片吸虫 cDNA文库 组织蛋白酶L1
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 25-28
• 页数: 4页
• 分类号: S852.7
• 字数: 2844字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-6422.2007.03.007

摘要

目的 大片吸虫cDNA文库的构建及组织蛋白酶L1(Fasciola gigantica Cathepsin L1,FgCL1)基因的克隆.方法 提取大片吸虫成虫总RNA,运用SMART技术构建大片吸虫cDNA文库.根据文献设计并合成PCR引物,从上述文库中克隆大片吸虫FgCL1基因,定向克隆至原核表达载体pET28a中.结果 文库容量为2.08×106pfu/mL,重组率为98%.扩增后的文库滴度为6.23×109 pfu/mL,插入片段平均大小约为1 000 bp.应用两个已知基因(FgCL1 FgGST)从文库中成功钓取到相应的全长基因.将含有FgCL1的阳性克隆测序,用Genebank Blast进行序列比较,证实为FgCL1基因.结论 成功构建了cDNA文库,提供筛选大片吸虫基因资源;从该文库中克隆出FgCL1,为进一步表达该基因,研制诊断试剂盒创造了条件.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	岳城		108	487	12.0	15.0