一种新型天蚕素杂合肽AD和aFGF突变体融合蛋白S的构建及表达

• 作者: 冯雅 吴晓萍 庞实锋 李校堃 苏志坚 郑青 黄亚东
• 来源期刊: 暨南大学学报(自然科学与医学版)
• 学科: 医学
• 关键词: 天蚕素杂合肽AD aFGF突变体 融合蛋白S
• 年，卷（期）: 2004,（4）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 420-425
• 页数: 6页
• 分类号: R318
• 字数: 3952字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-9965.2004.04.005

摘要

目的:构建和表达一种带有凝血酶切割位点的天蚕素杂合肽AD和人酸性成纤维细胞生长因子(acidic fibroblast growth factor, aFGF)突变体的融合蛋白S,在创伤皮肤表面应用时能自动裂解成有抗感染功能的天蚕素杂合肽AD和皮肤修复功能的aFGF突变体.方法:利用PCR技术分别扩增出带有凝血酶切割位点的天蚕素杂合肽AD基因和aFGF突变体基因.再利用两者作为模板,用PCR方法扩增出编码融合蛋白S的DNA.将该DNA片段插入到载体pPICZαA中,并利用电转法将质粒转入毕赤酵母smd1168中,Zeocin抗性筛选重组转化子.甲醇诱导72 h,SDS-PAGE电泳检测融合蛋白S的表达,并用Western-blot杂交检测融合蛋白S的免疫原性.结果:筛选出的重组转化株在甲醇诱导后能表达相对分子质量约为19 000的融合蛋白S,而该蛋白能与aFGF抗体产生免疫反应.结论:用PCR方法获得编码含凝血酶切割位点的天蚕素杂合肽AD和aFGF突变体的融合蛋白S DNA,并在毕赤酵母中实现了表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑青	暨南大学药学院生物制药教研室	67	505	12.0	19.0
2	吴晓萍	暨南大学药学院生物制药教研室	48	316	9.0	15.0
3	李校堃	暨南大学药学院生物制药教研室	76	722	14.0	21.0
4	黄亚东	暨南大学药学院生物制药教研室	85	740	15.0	23.0
5	苏志坚	暨南大学药学院生物制药教研室	51	273	8.0	14.0
6	冯雅	暨南大学医药生物技术研究开发中心	5	15	2.0	3.0
7	庞实锋	暨南大学医药生物技术研究开发中心	3	13	2.0	3.0