鸡瘦蛋白基因克隆中的若干问题研究

• 作者: 李辉 王启贵 赵建国 顾志良
• 来源期刊: 东北农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡 Leptin基因 克隆
• 年，卷（期）: 2004,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 712-718
• 页数: 7页
• 分类号: S831|Q813.4
• 字数: 4368字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-9369.2004.06.016

摘要

根据GenBank中鸡的Leptin mRNA序列(Accession No.AF012727)设计12对引物,用RT-PCR方法从不同品种(系)、不同时期及不同处理鸡的脂肪、肝脏和卵巢组织总RNA中没有扩增出鸡的Leptin基因片段;根据鸡的EST数据库中查到的一条鸡Leptin基因前体序列设计4对引物,用RT-PCR方法在包括卵巢在内的多个组织的cDNA中没能扩增出正确序列.为提高鸡Leptin基因的表达水平,通过给鸡注射胰岛素,利用RT-PCR方法对肝脏、卵巢和脂肪组织的总RNA进行扩增,没有得到目的序列.根据已发表的哺乳动物的Leptin基因序列设计兼并引物对鸡基因组DNA和脂肪、肝脏组织的cDNA进行PCR,结果没有特异性扩增条带,但在小鼠的基因组中可以获得稳定的扩增条带.用扩增长片段LA Taq酶从鸡基因组DNA中也没有扩增出Leptin基因片段,而从小鼠的基因组DNA中,可扩增出小鼠Leptin基因片段;以小鼠Leptin cDNA片段为探针,对鸡脂肪组织和肝脏组织来源的总RNA进行Northern Blot分析,并未获得杂交信号;以猪的Leptin cDNA片段为探针,对鸡基因组DNA进行Southern Blot分析,并未获得特异性的结果.研究结果表明,在鸡的脂肪、肝脏和卵巢组织中不存在与小鼠Leptin基因同源性如此高的mRNA序列,在鸡的基因组中也不存在与小鼠、猪等哺乳动物Leptin基因序列同源性如此高的基因组基因序列.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李辉	东北农业大学动物科技学院	142	1989	22.0	39.0
2	王启贵	东北农业大学动物科技学院	41	949	14.0	30.0
3	赵建国	东北农业大学动物科技学院	9	396	8.0	9.0
4	顾志良	东北农业大学动物科技学院	8	433	8.0	8.0