基因重组HBV的构建及其表达反义RNA抗-HBV作用的研究

• 作者: 刘风军 孙殿兴 李娟 胡大荣 胡学玲 范公忍 邬光惠
• 来源期刊: 中华传染病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝炎病毒,乙型 遗传载体 RNA反义 基因疗法
• 年，卷（期）: 2004,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 90-93
• 页数: 4页
• 分类号: R37
• 字数: 3096字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:1000-6680.2004.02.005

摘要

目的探索利用乙型肝炎病毒(HBV)作为基因治疗载体的可能性及检验其表达反义RNA抗HBV的作用.方法在表达完整HBV颗粒的质粒上,经基因修饰后分别表达S或S启动子区的反义RNA,整合于具有HBV复制的2.2.15细胞,形成细胞克隆,酶联免疫吸附(ELISA)法检测细胞培养上清液中HBsAg和HBeAg,斑点杂交法检测细胞内HBV核壳中HBV DNA,聚合酶链反应(PCR)法检测上清液中重组HBV颗粒.结果2.2.15-pMEP4组、2.2.15-SAS组和2.2 15-PAS组对HBsAg平均抑制率分别为(2.74±3.83)%、(66.54±4.45)%(P＜0.01)和(55.18±3.27)%(P＜0.01);对HBeAg平均抑制率分别为(4.46±4.25)%、(26.36±1.69)%(P＜0.01)和(65.54±3.22)%(P＜0.01);对HBV复制的抑制率分别为17.0%、59.9%和72.8%.2.2.15-SAS组及2.2.15-PAS组培养上清液中能检测出突变型HBV颗粒.结论经过对HBV基因组的两处改造,分别在细胞内表达S区及S启动子区反义RNA具有干扰HBV复制及抑制HBV抗原表达的作用;在2.2.15细胞中野生型HBV辅助下,仍能包装并分泌完整的HBV样颗粒.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡大荣	北京军区总医院肝病研究所	103	882	15.0	26.0
2	邬光惠	北京军区总医院肝病研究所	24	142	7.0	11.0
3	范公忍	北京军区总医院肝病研究所	92	597	12.0	19.0
4	李娟	北京军区总医院肝病研究所	58	347	10.0	16.0
5	胡学玲	北京军区总医院肝病研究所	39	217	9.0	13.0
6	刘风军		2	1	1.0	1.0