抑制HBV复制的小干扰RNA的重组腺病毒构建与鉴定

• 作者: 潘修成 羊正纲 金晗英 陈智
• 来源期刊: 浙江医学
• 关键词: HBV 腺病毒载体 RNA干扰
• 年，卷（期）: 2009,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1064-1066,1078
• 页数: 4页
• 字数: 3502字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-2785.2009.08.009

摘要

目的 构建可同时表达绿荧光蛋白(GFP)和针对HBV S区基因的小干扰RNA(siRNA)的重组腺病毒,并研究该siRNA在体外对HBV的抑制作用.方法 采用PCR技术自质粒pEGFP-C1中扩增含CMV启动子的GFP表达框,自质粒pAVU6+4sh579中扩增含U6启动子的针对HBV S区579-597位基因的siRNA表达框,分别将两个表达框克隆至穿梭载体质粒pShuttle内,与质粒pADEasy-1在大肠杆菌BJ5183内进行同源重组,将阳性重组体DNA转染至人胚肾细胞株HEK293细胞中进行包装、扩增,并在HepG2.2.15细胞中初步观察其对HBV复制的抑制疗效.结果 构建了可同时表达GFP和siRNA的重组腺病毒.其可在HEK293细胞中进行包装、扩增,并在HepG2.2.15细胞中对HBV-DNA、HBsAg和HBeAg的表达具有抑制作用.结论 成功构建了可同时表达GFP和针对HBV的siRNA的重组腺病毒,并在体外实验中证实了其对HBV复制具有抑制作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈智	浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所	162	1080	15.0	27.0
2	羊正纲	浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所	11	54	4.0	7.0
3	金晗英		4	11	2.0	3.0
4	潘修成	浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所	3	14	2.0	3.0