共表达新城疫病毒F基因和H9亚型禽流感病毒HA基因的重组鸡痘病毒

• 作者: 刘玉良 刘秀梵 卢建红 邵卫星 韦栋平
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 新城疫病毒 H9亚型禽流感病毒 重组鸡痘病毒 融合蛋白 血凝素
• 年，卷（期）: 2004,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 286-290
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 4989字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0001-6209.2004.03.004

摘要

应用RT-PCR扩增出新城疫病毒F48E8株融合蛋白(F)基因,将其克隆入pGEM-T easy vector构建重组质粒pGEM-TF并进行测序确证.分别从pGEM-T和pUCHA切下F基因和H9亚型禽流感病毒F株(A/chicken/china/F/1998)血凝素(HA)基因,通过一系列分子生物学操作步骤插入到质粒pFPV7S中的鸡痘病毒基因组复制非必需片段构建重组质粒p7SHF,其中F基因和HA基因分别由鸡痘病毒启动子PE/L和合成启动子PS调控.最后将P11-LacZ报告基因表达盒插入质粒p7SHF获得转移载体pFPVHF,用以转染已预先感染鸡痘病毒282E4疫苗株的鸡胚成纤维细胞(CEF).通过在含有X-Gal的营养琼脂上连续挑选蓝色病毒蚀斑获得并纯化重组病毒.PCR和Southern blot检测证实了F基因和HA基因已插入鸡痘病毒的基因组;间接免疫荧光试验结果表明重组病毒能够同时正确表达HA和F蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘秀梵	扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室	373	3732	28.0	39.0
2	卢建红	扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室	23	330	12.0	18.0
3	邵卫星	扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室	18	256	11.0	15.0
4	刘玉良	扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室	20	180	10.0	13.0
5	韦栋平	扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室	13	170	7.0	13.0