猪白细胞介素-2在甲醇酵母中的表达

• 作者: 严琳 何启盖 肖少波 覃雅丽 陈焕春
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪白细胞介素-2 甲醇酵母 Pichia pastoris 酵母表达
• 年，卷（期）: 2004,（2）
• 所属期刊栏目: 兽医
• 页码范围: 208-212
• 页数: 5页
• 分类号: S852
• 字数: 4250字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0366-6964.2004.02.018

摘要

将猪白细胞介素-2(pIL-2)的完整cDNA序列克隆到甲醇酵母(Pichia pastoris)表达载体pPIC3.5K中,在E.coli体系中鉴定得到阳性克隆子pPIC3.5K-IL2.将pPIC3.5K-IL2经SacI线性化后,转化入经LiC1致敏的P.Pastoris GS115菌株中,得到的重组菌株经1%浓度甲醇诱导后,利用SDS-PAGE电泳,斑点杂交及去糖基化酶消化证实,在培养上清中获得了分泌型表达的猪白细胞介素-2(蛋白分子量约为20 KD),其表达量可达到80 mg/L.用CTLL-2细胞进行活性检测,生物学活性可达2×106 IU/ml.对其表达情况进行时间梯度分析,确定第5天表达量达到最高点,为最佳诱导时间;分析连续4个批次的重组菌株表达情况,结果表明重组菌株在适当菌体浓度下连续培养均能稳定、高效的表达外源蛋白pIL-2.本实验为进一步大规模生产pIL-2提供了理论依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈焕春	华中农业大学畜牧兽医学院动物病毒室	331	4866	36.0	53.0
2	何启盖	华中农业大学畜牧兽医学院动物病毒室	170	2510	25.0	42.0
3	肖少波	华中农业大学畜牧兽医学院动物病毒室	79	1105	19.0	30.0
4	覃雅丽	华中农业大学畜牧兽医学院动物病毒室	9	238	8.0	9.0
5	严琳	华中农业大学畜牧兽医学院动物病毒室	6	84	5.0	6.0