可溶性TRAIL蛋白的高密度培养及补料策略研究

• 作者: 周劲松 夏小霞 孙爱友 张国钧 沈亚领 焦炳华 王梁华 章越 魏东芝
• 来源期刊: 生物工程学报
• 学科: 工学
• 关键词: 重组大肠杆菌 分批补料 发酵 TRAIL 分离纯化
• 年，卷（期）: 2004,（3）
• 所属期刊栏目: 发酵工程
• 页码范围: 408-413
• 页数: 6页
• 分类号: TQ92
• 字数: 5090字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3061.2004.03.019

摘要

采用分批补料的方法高密度培养重组大肠杆菌C600/pBV-TRAIL制备人可溶性TRAIL蛋白,优化发酵工艺,探索简单高效的分离纯化方法并测定蛋白生物活性.通过比较几种不同的补料策略:间歇流加、DO-stat、pH-stat,摸索了一种流加策略,即DO-stat-pH-stat组合流加,有效的避免了发酵过程中,尤其是诱导表达阶段乙酸积累的增加,使TRAIL蛋白在高密度培养条件下,得到高效表达.菌体密度最终达到300g/L(WCW)以上,可溶性TRAIL蛋白占菌体总蛋白的4.2%,含量为1.1g/L.在整个发酵过程中,乙酸浓度接近于0,且未使用任何特殊手段,如纯氧、加压等,简化了发酵工艺,降低了发酵成本,为TRAIL的工业化生产创造了条件.