棉铃虫组织蛋白酶B酶原在大肠杆菌中的表达及纯化

• 作者: 杜欣军 王金星 赵小凡 邵丁丁 邵红莲
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 棉铃虫 组织蛋白酶B 重组表达 包涵体 复性
• 年，卷（期）: 2004,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 162-166
• 页数: 5页
• 分类号: S5
• 字数: 4362字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2004.02.009

摘要

用合成的基因特异性引物通过RT-PCR扩增,获得棉铃虫(Helicoverpa armigera)组织蛋白酶B基因(HCB),将基因克隆到pGEX-4T-1载体,在大肠杆菌(Escherichia coii)DH5α内进行扩增,经过PCR筛选获得阳性克隆并提取质粒和测序验证后,再转化大肠杆菌BL21进行诱导表达.表达产物为组织蛋白酶B-谷胱甘肽S转移酶的融合蛋白,分子量在63 kD左右.表达产物形成了包涵体,经过对包涵体变性和复性处理,得到了可溶性的融合蛋白,可被Glutathione Sepharose 4B柱亲和纯化,用凝血酶裂解融合蛋白后,经SDS-PAGE分离到37 kD左右的棉铃虫组织蛋白酶B酶原.N-末端氨基酸测序鉴定表达产物为棉铃虫组织蛋白酶B.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵小凡	山东大学生命科学院生化与分子生物学研究所	50	618	13.0	24.0
2	王金星	山东大学生命科学院生化与分子生物学研究所	53	698	15.0	25.0
3	杜欣军	山东大学生命科学院生化与分子生物学研究所	6	57	4.0	6.0
4	邵红莲	山东大学生命科学院生化与分子生物学研究所	8	88	4.0	8.0
5	邵丁丁	山东大学生命科学院生化与分子生物学研究所	2	19	1.0	2.0