两株鼠抗人GL50单克隆抗体的制备及其生物学特性的初步研究

• 作者: 张学光 徐颖 於葛华 朱伟 李文香 邓忠彬 陆长明 马泓冰
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: GL50 杂交瘤 单克隆抗体 共刺激分子
• 年，卷（期）: 2004,（10）
• 所属期刊栏目: 抗体工程
• 页码范围: 794-798
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 4791字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.2004.10.010

摘要

目的研制鼠抗人GL50分子单克隆抗体并对其生物学特性进行初步研究. 方法以天然高表达人GL50分子的Daudi细胞为免疫原,人GL50-L929转基因细胞为目的单克隆抗体(McAb)的筛选细胞,采用B淋巴细胞杂交瘤技术,获得分泌特异性鼠抗人GL50分子McAb的杂交瘤细胞株;免疫荧光标记和流式细胞术分析McAb识别GL50的表达;Western blot检测抗体对特异性细胞膜蛋白的识别;台盼蓝(Trypan blue)染色细胞计数法和MTT法检测McAb对Daudi 细胞体外生长的抑制作用;3H-TdR法检测抗体对GL50-L转基因细胞介导的活化T细胞体外增殖的效应. 结果成功制备2株分泌特异性抗人GL50抗体的杂交瘤细胞株12B11和11C4;两者皆为IgG2a亚型;腹水效价皆在1∶1000以上;12B11、11C4特异性地识别GL50分子.11C4 McAb可以明显抑制Daudi细胞在体外的生长,并可抑制GL50-L转基因细胞介导的活化T淋巴细胞的体外增殖效应. 结论成功获得了2株特异性鼠抗人GL50抗体,其中11C4 McAb具有诱导表达GL50分子的B淋巴瘤细胞Daudi的体外生长抑制作用;在T淋巴细胞体外增殖反应中发挥了重要的调节作用.