ZNF268基因启动子区的克隆及功能分析

• 作者: 刘辉 孙燕 彭晓 李文鑫 苟德明
• 来源期刊: 遗传学报
• 学科: 生物学
• 关键词: ZNF268基因 启动子 克隆 转录调控
• 年，卷（期）: 2004,（3）
• 所属期刊栏目: 人类与医学遗传学
• 页码范围: 221-226
• 页数: 6页
• 分类号: Q75
• 字数: 1642字
• 语种: 中文

摘要

锌指基因家族是人体中最大的基因家族,它参与细胞分化、胚胎发育,并与许多疾病的发生相关.人类ZNF268基因是一个在人胚肝中特异性表达的C2H2型锌指基因,并可能在人的早期肝脏发育中起重要作用.为了研究ZNF268基因表达调控的分子机制, 以正常人总基因组为模板PCR扩增了ZNF268基因的5′调控区2533 bp片段,并将此片段插入启动子缺失的EGFP(增强型绿色荧光蛋白)载体构建了重组质粒pZNF268-EGFP.用脂质体介导的方法将pZNF268-EGFP转染NIH/3T3、COS7、K562、HeLa 4个细胞系.在激光共聚焦显微镜下观察绿色荧光的表达,发现在每个细胞系中,转染了重组质粒pZNF268-EGFP的细胞均有荧光表达,但其起始表达时间均晚于转染了阳性对照质粒pEGFP-C1的细胞且荧光较弱.这表明ZNF268基因的5′调控区2.5 kb片段是一个有功能的启动子,但该启动子与CMV启动子相比活性较弱.选择易培养的HeLa细胞系用于缺失研究.将一系列5′端-2456 bp至-20 bp缺失、3′端均为+77 bp的缺失片段插入启动子缺失的CAT(氯酶素酰胺转移酶)载体构建了一系列重组质粒.将这些重组质粒转染HeLa细胞系进行缺失分析,并通过共转染pCMV-Sport-β gal质粒校正转染效率.结果表明,ZNF268启动子-2456～-1639 bp区域可能含有正调控元件,-1244～-1013 bp和-525～-156 bp区域可能含有负调控元件,ZNF268启动子激活转录的一个重要区域位于-156～-20 bp.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	苟德明	武汉大学生命科学学院生物技术系	10	99	4.0	9.0
2	李文鑫	武汉大学生命科学学院生物技术系	71	338	11.0	15.0
3	刘辉	武汉大学生命科学学院生物技术系	62	367	12.0	15.0
4	孙燕	武汉大学生命科学学院生物技术系	22	114	6.0	10.0
5	彭晓	武汉大学生命科学学院生物技术系	1	1	1.0	1.0