剑尾鱼微卫星DNA的筛选

• 作者: 劳海华 叶星 吴淑勤 李霞 白俊杰 简清
• 来源期刊: 中国水产科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 剑尾鱼 微卫星 序列
• 年，卷（期）: 2004,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 196-201
• 页数: 6页
• 分类号: Q959.475
• 字数: 3640字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1005-8737.2004.03.004

摘要

以剑尾鱼(Xiphophorus helleri)为材料,经MboⅠ限制性内切酶消化基因组DNA后,选取500～2 000 bp的片段连接到经BamHⅠ酶切的pUC18载体上,转化大肠杆菌DH5α构建部分基因组文库.采用设计合成的(AC)7、(GT)7重复序列为引物,PCR筛选部分基因组文库,对其中9个重组阳性克隆进行测序,结果共获得24个微卫星序列,其中Perfect(完美型)13个,占54.2%;Imperfect(非完美型)3个,占12.5%;Compound(混合型)8个,占33.3%.表明(AC/GT)n在剑尾鱼的基因组DNA中含量非常丰富.同时,根据其中3个克隆微卫星的侧翼序列设计引物,PCR扩增剑尾鱼基因组DNA,结果均扩增到目的片段.而且,这3对引物扩增出来的微卫星片段在非选育的剑尾鱼中显示出多态性,而在近交系19代则表现为单态,为剑尾鱼的实验动物化遗传研究提供了理论依据.