豚草花粉泛过敏原同源基因克隆与序列分析

• 作者: 何韶衡 陶爱林
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 基因克隆 多序列比较 泛过敏原 豚草
• 年，卷（期）: 2004,（3）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 169-173
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 4248字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.2004.03.002

摘要

目的克隆豚草花粉泛过敏原同源基因. 方法采用生物信息学分析方法对众多的花粉过敏原基因进行序列同源性比较,以序列保守区域为依据设计合成简并引物,在特殊的RT-PCR条件下,结合RACE技术对豚草花粉中的过敏原全长基因进行克隆;通过Northern杂交及序列分析初步确定基因产物是否为花粉过敏原. 结果获得了3个新的全长基因.序列分析显示:所得过敏原同源基因与数十种不同种属来源的过敏原肌动蛋白结合蛋白(profilin)具有较高的同源性,初步认定其为泛过敏原,并暂命名为Amb a 8(t).Northern杂交证实该基因在花粉中表达. 结论采用本研究方法成功地在豚草花粉中克隆到3个泛过敏原基因,为豚草花粉重组过敏原的蛋白质表达及标准化奠定了物质基础.