小麦NBS-LRR类抗病基因同源cDNA序列的克隆与表达分析

• 作者: 任晓娣 刘大群 刘彦慧 张娜 彭巧慧 李建螈 杨文香
• 来源期刊: 河北农业大学学报
• 关键词: 小麦 核苷酸结合位点(NBS) 富含亮氨酸重复(LRR) 抗病基因同源序列(RGAs) cDNA末端快速扩增技术(RACE) 实时定量PCR(real-time PCR)
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 页码范围: 69-74,79
• 页数: 7页
• 分类号: S435.121.4+3
• 语种: 中文

摘要

为获得小麦抗叶锈病相关基因,以小麦近等基因系TcLr19所构建的非亲和cDNA文库中获得的EST序列(Contig 914)为靶序列,用RT-PCR方法和cDNA末端快速扩增技术,分离克隆到片段为3 042 bp的全长cDNA序列.序列分析表明该序列符合典型单子叶植物的CC-NBS-LRR结构模式,命名为TaNLR.该基因包含一个完整的2 739 bp的开放阅读框(ORF),具有连续的Poly A尾和典型的加尾信号AATTAA.ProtParam程序预测表明该基因编码912个氨基酸.发育树分析显示该氨基酸序列与大麦的NBS-LRR类抗病基因蛋白同源性最高达89％.荧光定量PCR分析表明,在小麦与叶锈菌互作中,TaNLR基因受叶锈菌诱导下调表达.本研究在TcLr19小麦中成功获得了抗病同源基因,这为明确NBS-LRR在小麦抗叶锈病中的作用奠定了基础.