人白细胞介素18(hIL-18)的纯化及生物学活性的鉴定

• 作者: 刘力华 方艳秋 杨广民 谭岩
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 重组人白细胞介素18 凝胶过滤 T细胞 NK细胞 细胞因子
• 年，卷（期）: 2004,（12）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 850-854
• 页数: 5页
• 分类号: R392.1|R73-35
• 字数: 4918字
• 语种: 中文

摘要

目的:在大肠杆菌中高效表达重组人IL-18(rhIL-18)蛋白,制备具有高纯度、高活性的rhIL-18.方法:用IPTG诱导重组蛋白表达载体pKK223-3/hIL-18进行蛋白表达;菌体经超声破碎分离包含体,并对包含体进行洗涤、变性和复性处理,用DEAE-Sepharose CL-6B阴离子交换柱纯化复性的rhIL-18;以人外周血单核淋巴细胞,通过T细胞增殖实验、125I-UdR标记的细胞毒实验、ELISA方法检测细胞因子的产生量等方法,测定rhIL-18的生物学活性.结果:在大肠杆菌中成功地诱导、表达了rhIL-18,SDS-PAGE凝胶电泳分离显示在分子量大约18.3 kD处有一诱导蛋白带,Western blot证明表达产物与抗IL-18单克隆抗体有特异性免疫反应;表达产物经纯化后纯度达94%;表达的rhIL-18蛋白具有促进T细胞增殖、增强NK细胞细胞毒作用及诱导外周血单核淋巴细胞合成IFN-γ的能力,基本上具有天然IL-18相同的生物学活性.结论:为rhIL-18的获得及为进一步研究其生物学功能提供了一定的条件,并为将rhIL-18用于肿瘤的免疫生物治疗奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谭岩	吉林大学第一医院中心实验室	135	608	9.0	17.0
2	刘力华	吉林大学第一医院中心实验室	51	162	6.0	9.0
3	方艳秋	吉林大学第一医院中心实验室	76	250	7.0	11.0
4	杨广民	吉林省人民医院中心实验室	52	268	9.0	13.0