鸡白细胞介素-18(ChIL-18)重组蛋白的生物学活性检测

• 作者: 刘翠艳 李宏梅 田兆菊 胡敬东 赵宏坤 郑玉姝 马凤龙
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡白细胞介素-18 原核表达 纯化 生物学活性
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 5-10
• 页数: 6页
• 分类号: S188
• 字数: 5360字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2007.01.002

摘要

对含有鸡白细胞介素-18(ChIL-18)基因的质粒在大肠杆菌(Escherichia coli)内进行诱导表达,经亲和层析法对表达产物进行纯化,用微量细胞病变抑制法CEF-VSV系统,检测其对SPF鸡脾淋巴细胞诱导产生γ-干扰素(IFN-γ)的活性和其对病毒的抑制效果;用3H-TdR掺入法和MTT法分别检测其对T淋巴细胞诱导转化和NK细胞杀伤活性的作用.结果表明,经诱导表达出分子量44kD的目的蛋白(与GST融合表达),纯化后得到去除菌体蛋白的高纯度目的蛋白;该蛋白能够诱导脾细胞产生IFN-γ,当浓度为250 ng/mL时诱导IFN-γ的活性最高,可达1x106 U/mL;但该蛋白不能直接抑制水疱性口炎病毒(VSV)在鸡胚成纤维细胞(CEF)上生长;能够刺激淋巴细胞显著增殖,浓度为250ng/mL时效果最佳;适当浓度的rChIL-18蛋白能促进NK细胞的杀伤活性,浓度为150 ng/mL时,作用最强.利用原核表达的重组鸡白细胞介素-18蛋白与天然鸡IL-18蛋白一样具有较广泛的生物学活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘翠艳	山东农业大学动物科技学院	29	300	10.0	16.0
2	赵宏坤	山东农业大学动物科技学院	109	1204	18.0	28.0
3	田兆菊	山东农业大学动物科技学院	10	51	3.0	7.0
4	胡敬东	山东农业大学动物科技学院	32	228	9.0	14.0
5	李宏梅	山东农业大学动物科技学院	26	186	8.0	13.0
6	郑玉姝	山东农业大学动物科技学院	6	73	6.0	6.0