重组鸡白细胞介素2的诱导表达与生物学活性测定

• 作者: 俞照正 周继勇 孙红霞 王金勇 郑肖娟 陈吉刚 陈维虎 齐静
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡 白细胞介素-2 生物学活性 单克隆抗体 多克隆抗体 抗原捕获ELISA
• 年，卷（期）: 2005,（5）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医·资源昆虫
• 页码范围: 1034-1039
• 页数: 6页
• 分类号: S8
• 字数: 4772字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0578-1752.2005.05.026

摘要

将去除信号肽的鸡IL-2基因编码框克隆到原核表达载体pBAD/His B,实现了重组鸡IL-2(rchIL-2)蛋白在大肠杆菌中的高效表达.SDS-PAGE分析显示,表达蛋白的分子量约为18 kD.用rchIL-2为抗原制备了单克隆抗体和多克隆抗体,建立了检测rchIL-2含量的抗原捕获ELISA,探讨了天然chIL-2蛋白的体外表达动力学.非变性条件下纯化的rchIL-2 (0.4 ng) 对Con A活化的鸡T淋巴细胞具有明显的增殖活性,而对鸭及鹅的T淋巴细胞无增殖活性.抗chIL-2多克隆抗体可完全中和rchIL-2和天然chIL-2蛋白的生物学活性,而单克隆抗体无中和rchIL-2和天然chIL-2蛋白生物学活性的功能.这些研究结果证实,大肠杆菌表达的rchIL-2及其多克隆抗体拥有生物学功能,而获得的单克隆抗体不具有chIL-2的中和特性.