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原文服务方: 畜牧兽医杂志       
摘要:
用已构建好的重组表达载体pET30-IL2转化BL-21 E.coli,挑取单克隆,利用诱导剂IPTG诱导表达;通过改变诱导剂的浓度、诱导的时间来摸索最佳诱导条件,在最佳诱导条件下大量表达,并利用镍层析柱纯化重组蛋白,用MTS法测定其生物学活性.结果表明,表达产物经SDS-PAGE分析,表达出25 ku的融合蛋白,表达产物主要以包涵体的形式存在,最佳的诱导剂浓度为0.1 mM,最佳的诱导时间为4h;对表达产物的包涵体处理后,用镍琼脂糖凝胶FF纯化,所得蛋白的纯度约在90%以上.通过透析除去部分尿素,复性后在体外利用MTS法检测其生物学特性,结果表明其仍具有较好的生物学活性,这为进一步大量制备和研究猪IL-2重组蛋白奠定了基础.
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文献信息
篇名 猪白细胞介素-2重组蛋白的原核表达及其生物学活性分析
来源期刊 畜牧兽医杂志 学科
关键词 猪白细胞介素2 原核表达 纯化 活性分析
年,卷(期) 2015,(3) 所属期刊栏目 试验研究
研究方向 页码范围 34-38
页数 5页 分类号 S828
字数 语种 中文
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畜牧兽医杂志
双月刊
1004-6704
61-1085/S
大16开
1982-01-01
chi
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