小麦花粉特异性表达的cDNA的分离及表达特性

• 作者: 边腾飞 金勇丰
• 来源期刊: 植物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 小麦 花粉特异性表达cDNA 基因表达 抑制差示杂交
• 年，卷（期）: 2004,（11）
• 所属期刊栏目: 分子与发育生物学
• 页码范围: 1347-1356
• 页数: 10页
• 分类号: Q943
• 字数: 698字
• 语种: 英文
• DOI: 10.3321/j.issn:1672-9072.2004.11.012

摘要

应用抑制差示杂交和5′/3′RACE PCR方法分离了小麦(Triticum aestivum L.)花粉特异性表达的全长cDNA(TaPSG719,GenBank:AY451238)),该基因全长1 172 bp,5′非编码区序列长达329 bp,包含多个上游可译框架(uORF);该基因编码1 88个氨基酸的蛋白质,大小约20 kD,等电点为12.1.Northern杂交和RT-PCR分析表明该基因在成熟花粉特异表达,而在小孢子、叶片、根和未成熟的种子、幼茎和子房等组织几乎检测不到.进一步研究小麦花粉发育过程的表达水平表明,TaPSG719在单核和双核小孢子阶段不表达,在开花前5 d(已完成有丝分裂)开始表达并迅速增强达到高峰,但随着花粉的成熟表达水平逐渐下降.表明TaPSG719是一个花粉中晚期特异性表达基因.经BLAST同源性分析表明,与目前已登录的基因没有显著的同源性.Southern杂交表明TaPSG719可能为一个多拷贝基因.为研究TaPSG719 cDNA 5′非编码区序列的uORF对可译框架的翻译的影响,构建不同缺失或突变的表达载体,采用麦胚体外翻译系统,结果显示含uORF的5′非编码区序列能显著抑制蛋白质的翻译水平,表明TaPSG719基因表达至少部分是在翻译水平上调控.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	金勇丰	浙江大学生物化学研究所	52	749	16.0	26.0
2	边腾飞	浙江大学生物化学研究所	2	25	2.0	2.0