用硫氰酸盐洗脱法直接测定噬菌体抗体的相对亲和力

• 作者: 刘玉峰 李春英 王刚 王琰 高天文
• 来源期刊: 生物工程学报
• 学科: 医学
• 关键词: 抗体亲和力 噬菌体抗体 硫氰酸盐洗脱法
• 年，卷（期）: 2004,（3）
• 所属期刊栏目: 抗体工程
• 页码范围: 429-433
• 页数: 5页
• 分类号: R392.11
• 字数: 1293字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3061.2004.03.022

摘要

抗体与相应抗原的结合可以被硫氰酸盐洗脱而解离,抗体的亲和力越高则解离所需要的硫氰酸盐浓度就越大,这一原理在传统的免疫学实验中被用来测定单克隆抗体或多克隆抗体的相对亲和力.如果证明该原理同样适用于噬菌体抗体库技术,则可以建立一种直接测定噬菌体抗体相对亲和力的简便方法.首先将噬菌体抗体与工作浓度的硫氰酸盐共孵育,以证明这一过程并不影响其后的ELISA反应,然后参照硫氰酸盐洗脱法测定完整抗体分子和Fab段相对亲和力的方法,在ELISA实验中以酶标抗M13为二抗检测了5个单克隆噬菌体抗体的相对亲和力,并与相对应的可溶性Fab段的相对亲和力进行了比较.被测抗体中包括3个克隆的抗角蛋白抗体和2个克隆的抗乙型肝炎表面抗原抗体.结果发现,用硫氰酸盐洗脱法测定5个噬菌体抗体所得到的亲和力排序与测定其相应可溶性Fab段所得结果一致,表明硫氰酸盐洗脱法可作为一种简便快速的方法用来直接测定噬菌体抗体的相对亲和力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘玉峰	第四军医大学西京医院全军皮肤病中心	278	1616	19.0	26.0
2	王刚	第四军医大学西京医院全军皮肤病中心	228	823	15.0	19.0
3	李春英	第四军医大学西京医院全军皮肤病中心	129	577	11.0	18.0
4	高天文	第四军医大学西京医院全军皮肤病中心	347	2023	20.0	29.0
5	王琰	解放军海军总医院中心实验科	15	176	9.0	13.0