利用RT—PCR和Dig—cDNA探针检测百合无症病毒

• 作者: 明艳林 李燕 林石明 郑国华 陈毓荃 陈青
• 来源期刊: 检验检疫科学
• 学科: 农学
• 关键词: 核苷酸 RT-PCR技术 Dig-cDNA探针 百合 无症病毒 RNA 检测技术
• 年，卷（期）: 2004,（B12）
• 页码范围: 42-44
• 页数: 3页
• 分类号: S436.8

摘要

根据百合无症病毒(LSV)的核苷酸序列设计一对特异性引物，利用RT—PCR技术扩增得到了一条与目的片段大小一致的条带；进一步克隆测序表明，该序列与已知的LSV序列有96％的同源性。用随机引物法合成地高辛标记的cDNA探针，建立了核酸斑点、杂交检测体系。本研究分别建立了用于LSV的特异性的高灵敏度RT—PCR检测体系(其检测灵敏度为1．4ng／叶片)和适合大通量检测的Dig—cDNA(地高辛标记)核酸斑点杂交检测体系(其检测灵敏度为20μg/叶片)。