四环素调控的WT1基因表达系统在U937中的建立

• 作者: 周箭 陈蓉 魏琴
• 来源期刊: 四川省卫生管理干部学院学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 四环素调控 基因表达 建立
• 年，卷（期）: 2004,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 83-84
• 页数: 2页
• 分类号: Q786
• 字数: 2492字
• 语种: 中文

摘要

目的:在白血病细胞系U937中建立四环素诱导的WT1基因表达系统.方法:运用脂质体将质粒pRevTet-On、pRevTRE-Luc和pRevTRE-WT1分别转染逆转录病毒的包装细胞PT67以产生逆转录病毒.将逆转录病毒RevTet-On感染U937细胞,经G418筛选,产生抗性细胞,用有限稀释法将U937/Tet-On抗性细胞单克隆化.14天后,克隆逐步形成,在显微镜下标记并移出.再将逆转录病毒RevTRE-Luc瞬时感染这些克隆,培养基中加入强力酶素(Dox)2mg/L或不加Dox,应用荧光素酶报告基因分析试剂盒检测荧光素酶的活性.挑选一株低背景和高诱导倍数的U937/Tet-On克隆,最后将逆转录病毒RevTRE-WT1感染这株克隆.结果:在U937中建立四环素调控的WT1基因表达系统.结论:建立逆转录病毒整合的U937细胞株,可用四环素及其衍生物精确调控WT1基因的表达,为研究WT1在白血病细胞系的功能提供一种有力的实验手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	魏琴	成都理工大学计算机系	11	17	2.0	3.0
2	陈蓉		14	10	2.0	2.0
3	周箭		12	14	2.0	3.0