炭疽菌保护性抗原受体结合区的表达与纯化

• 作者: 宋小红 徐俊杰 李冰 葛猛 董大勇 赵剑 郭强 陈薇
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 炭疽杆菌 保护性抗原 结构域4 基因表达
• 年，卷（期）: 2004,（10）
• 所属期刊栏目: 细菌学
• 页码范围: 799-801
• 页数: 3页
• 分类号: R3
• 字数: 2632字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.2004.10.011

摘要

目的在大肠杆菌中表达炭疽菌保护性抗原受体结合区. 方法将大肠杆菌外膜蛋白A(OmpA)的信号肽序列融合到炭疽菌保护性抗原(PA)受体结合区,即PA结构域4(PA-D4)基因的5′端,构建成分泌型表达质粒,在大肠杆菌中尝试 PA-D4的表达,并对重组蛋白进行纯化和鉴定. 结果重组PA-D4以可溶形式表达,表达量约占菌体总蛋白的10%.经过离子交换层析和凝胶过滤纯化,每升诱导培养物可获得约10mg PA-D4.蛋白N端测序表明PA-D4与天然序列一致.免疫印迹试验显示PA-D4可与抗PA血清结合. 结论在大肠杆菌中实现了PA-D4的分泌型表达,为进一步评估其作为新型疫苗和潜在治疗药物的可能性打下基础.