抗胰蛋白酶原激活肽单克隆抗体的制备及应用

• 作者: 徐霞 王慧
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 急性胰腺炎 胰蛋白酶原激活肽 单克隆抗体 ELISA
• 年，卷（期）: 2004,（4）
• 所属期刊栏目: 抗体工程
• 页码范围: 425-428
• 页数: 4页
• 分类号: R392.12
• 字数: 4447字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1007-8738.2004.04.011

摘要

目的:制备抗胰蛋白酶原激活肽(TAP)单克隆抗体(TAPmAb),并建立敏感、特异的TAP免疫检测方法.方法:将人工合成的TAP与血蓝蛋白(KLH)交联制成免疫原,免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与Sp2/0细胞融合,间接ELISA筛选阳性克隆,经多次克隆化,获得稳定分泌TAP mAb的杂交瘤细胞株,并进行鉴定,进而建立检测TAP的ELSIA竞争法.结果:获得10株能稳定分泌TAP mAb的杂交瘤细胞株,除1株为IgG1外,余9株均为IgM类;效价达1:105～1:106;与BSA、人白蛋白、胰蛋白酶原、淀粉酶均无交叉反应,中和抑制试验表明培养上清、腹水中的抗体能明显被TAP中和.建立了检测TAP的ELISA竞争法,灵敏度为0.69μg/L,批内变异系数为9.10%,批间变异系数为10.33%.用该法测定急性胰腺炎组患者及对照组患者TAP含量分别为57.35ug/L及9.30μg/L(P＜0.01).结论:成功制备抗TAP mAb,并建立了敏感的ELISA竞争法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐霞	广州医学院检验系临床免疫教研室	69	314	10.0	13.0
2	王慧	广州医学院检验系临床免疫教研室	34	189	7.0	12.0