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3种基于PCR的荧光标记方法的比较研究
3种基于PCR的荧光标记方法的比较研究
作者:
张敏丽
文思远
王升启
陈苏红
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
基因芯片
荧光标记
核酸杂交
核苷酸类
聚合酶链反应
摘要:
目的:荧光标记物是目前杂交型基因芯片所检测的主要目标底物,本实验比较了3种基于PCR的荧光标记方法在基因芯片检测中的应用效果.方法:荧光分子标记的引物或荧光分子修饰的核苷酸可以在PCR反应中通过Taq,Pfu等DNA聚合酶掺入到PCR产物中,在此过程中,荧光分子又可以通过不同的方法掺入到PCR产物中.方法1:直接将荧光分子化学合成在引物的5′端;方法2:在PCR反应体系中加入荧光分子修饰的核苷酸单体,由DNA聚合酶将其掺入PCR产物中;方法3:对PCR产物通过非模板依赖性的酶促加尾反应在其3′端随机加入荧光修饰的核苷酸.本实验优化了3种荧光标记方法,并以检测CYP3A4基因外显子5中4个核苷酸位点的探针微阵列为例,比较了检测效果.结果:在各自优化的实验条件下,从扩增、标记效率以及芯片杂交的信号强度、背景、分辨率等方面进行比较,3种方法得到的荧光标记样品无明显区别,但后两种方法操作过程复杂,使用成本高,对反应条件苛刻.结论:3种基于PCR扩增的荧光标记方法均可以提供优质的荧光标记探针或样品(底物),在实际应用中,各自有不同的特点及适用范围.
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(/年)
文献信息
篇名
3种基于PCR的荧光标记方法的比较研究
来源期刊
军事医学科学院院刊
学科
生物学
关键词
基因芯片
荧光标记
核酸杂交
核苷酸类
聚合酶链反应
年,卷(期)
2004,(4)
所属期刊栏目
技术方法
研究方向
页码范围
364-368
页数
5页
分类号
Q524
字数
3769字
语种
中文
DOI
10.3969/j.issn.1674-9960.2004.04.019
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
王升启
军事医学科学院放射医学研究所
315
3297
28.0
41.0
2
文思远
军事医学科学院放射医学研究所
32
312
10.0
16.0
3
张敏丽
军事医学科学院放射医学研究所
38
388
12.0
18.0
4
陈苏红
军事医学科学院放射医学研究所
44
306
9.0
15.0
传播情况
被引次数趋势
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引文网络
引文网络
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研究主题发展历程
节点文献
基因芯片
荧光标记
核酸杂交
核苷酸类
聚合酶链反应
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
军事医学
主办单位:
军事医学科学院
出版周期:
月刊
ISSN:
1674-9960
CN:
11-5950/R
开本:
大16开
出版地:
北京太平路27号
邮发代号:
82-757
创刊时间:
1956
语种:
chi
出版文献量(篇)
4313
总下载数(次)
13
总被引数(次)
15987
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