AT基因13387-9delG突变引起遗传性抗凝血酶缺陷症的分子病理机制研究

• 作者: 丁秋兰 严力行 傅启华 周荣富 武文漫 王学锋 王振义 王文斌 王鸿利 胡翊群
• 来源期刊: 中国实验诊断学
• 学科: 医学
• 关键词: 抗凝血酶 基因 突变
• 年，卷（期）: 2004,（5）
• 所属期刊栏目: 论著及论著摘要
• 页码范围: 462-465
• 页数: 4页
• 分类号: R552
• 字数: 2902字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-4287.2004.05.004

摘要

目的研究AT基因13387-9delG突变引起AT缺陷症的分子病理机制.方法用大引物法构建13387-9delG突变体AT重组表达质粒(ATM),并将其和正常AT重组表达质粒(ATN)分别用Supeffect试剂转染COS7细胞或CHO细胞,进行体外表达试验、脉冲追踪试验以及细胞免疫荧光染色.结果ATM转染的COS7细胞培养上清液中检测不到AT抗原,而在细胞裂解液中,其AT抗原仅为转染ATN的27.13%.脉冲追踪试验发现,在ATM转染的COS7细胞培养上清液中,检测不到35S标记的AT蛋白,在chase 0 min时,ATM细胞内35S标记的AT蛋白只有ATN的27.8%;在chase 180 min时,ATM细胞内35S标记的AT蛋白为0 min时的50%左右.细胞免疫荧光试验的结果表明,ATM转染的CHO细胞内荧光强度明显低于ATN转染的CHO细胞.结论编码的突变AT蛋白分泌障碍和细胞内快速降解,是AT基因13387-9delG突变引起AT缺陷症的分子病理机制.