腺病毒介导的mIL-12基因转染H22细胞及对其生长的影响

• 作者: 严林 潘运龙 王华曦 覃莉
• 来源期刊: 暨南大学学报（自然科学与医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 白介素12 腺病毒 转染 H22细胞
• 年，卷（期）: 2004,（6）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 675-680
• 页数: 6页
• 分类号: R735.7
• 字数: 3586字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-9965.2004.06.003

摘要

目的:研究重组小鼠白介素-12腺病毒(AdvmIL-12)和携带增强型荧光蛋白腺病毒(Adv-EGFP)在小鼠肝癌细胞H22中的转染及对其生长的影响.方法:将mIL-12基因p35、p40的cDNA分别插入5型腺病毒的E1和E3区构建成AdvmIL-12,分离纯化后进行鉴定、病毒滴度检测;同法构建含增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的重组腺病毒(Adv-EGFP).在不同的感染复数(MOI)、感染时间(TOI)条件下用Adv-EGFP转染H22细胞,观察Adv-EGFP的转染率.用AdvmIL-12、Adv-EGFP分别转染H22细胞,ELISA法检测上清液中mIL-12的含量.改良MTT法检测AdvmIL-12、Adv-EGFP在体外对H22细胞生长的影响.结果:得到AdvmIL-12和Adv-EGFP,每毫升空斑形成单位(PFU/mL)分别为1×108、1×109.TOI为1、2、4、24 h时,转染效率分别为87.67%、96.38%、96.43%和96.32%;MOI为0、50、100、200、500时,转染效率分别为0、89.29%、96.41%、96.72%和98.37%.106个AdvmIL-12/H22细胞上清液中mIL-12(48 h)为(89.71±22.05) ng.AdvmIL-12和Adv-EGFP对H22细胞生长无抑制.结论:本实验成功构建了AdvmIL-12和Adv-EGFP,它们在体外能够转染H22细胞,并能表达mIL-12和EGFP,但不能抑制H22细胞的生长.感染复数为100、感染时间为2 h是重组腺病毒转染H22细胞的最适条件.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	潘运龙	暨南大学附属第一医院普外科	75	556	14.0	20.0
2	覃莉	暨南大学医学院组织胚胎学教研室	66	436	13.0	17.0
3	王华曦	暨南大学附属第一医院普外科	29	101	6.0	8.0
4	严林	暨南大学附属第一医院普外科	6	27	3.0	5.0