用RNase Ⅲ制备的小干涉RNA降解SARS冠状病毒基因的细胞内转录物

• 作者: 党颖 冯怡 朱旭东 李涛 黄培堂
• 来源期刊: 生物工程学报
• 学科: 医学
• 关键词: SARS冠状病毒 RNA干涉 RNA依赖的RNA聚合酶 刺突蛋白 核衣壳蛋白
• 年，卷（期）: 2004,（4）
• 所属期刊栏目: 基因工程
• 页码范围: 484-489
• 页数: 6页
• 分类号: Q89|R373
• 字数: 3327字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3061.2004.04.003

摘要

SARS冠状病毒是引起重症急性呼吸综合症的主要原因,目前尚没有特效药物或疫苗对抗这种新病毒.RNA干涉是指双链RNA可以特异地降解细胞内同源基因的mRNA.在哺乳动物细胞中,<30bp的小双链RNA能引起RNA干涉,又可以避免干扰素反应.通过体外转录得到SARS病毒3种基因RNA依赖的RNA聚合酶、刺突蛋白及核衣壳蛋白部分片段的长双链RNA,然后用RNase Ⅲ有限切割成长度<30bp的小干涉RNA.同时把上述3种基因片段分别连接到质粒pGL3-Control中,得到的3个质粒pGL-R、pGL-S和pGL-N可以分别在细胞内转录出荧光素酶-RNA依赖的RNA聚合酶、-刺突蛋白、-核衣壳蛋白的杂合mRNA.上述质粒分别和相应的小干涉RNA共转染HEK293F细胞,测定荧光素酶活性,结果小干涉RNA使相应质粒表达荧光素酶的活性显著下降;用逆转录定量PCR反应测量mRNA丰度,结果表明上述小干涉RNA可以特异地降解相应的病毒基因转录物.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱旭东		5	58	4.0	5.0
2	黄培堂		10	72	5.0	8.0
3	冯怡		4	56	3.0	4.0
4	党颖		1	12	1.0	1.0
5	李涛		1	12	1.0	1.0