原核表达hbFGF结构与功能优化的研究

• 作者: 余榕捷 孙奋勇 洪岸 潘秋辉 谢秋玲
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 人碱性成纤维细胞生长因子 二硫键 定点突变 包涵体
• 年，卷（期）: 2004,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 504-506
• 页数: 3页
• 分类号: Q939
• 字数: 2318字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0001-6209.2004.04.021

摘要

野生型hbFGF蛋白可溶性与稳定性较低一直是困扰研发人员的难题.分析其氨基酸序列发现含有4个游离巯基,其中第78、96、101位半胱氨酸游离巯基可能直接影响其可溶性、稳定性及活性. 对天然hbFGF进行定点突变,一组将Cys78、Cys96同时突变,另一组将Cys78、Cys96与Cys101进行联合突变,均改为丝氨酸密码子,然后克隆入原核表达载体pET-3c,进行表达, 结果发现两种突变蛋白的可溶性大幅度增加,稳定性明显上升,其中三点突变的效果更为显著,但蛋白质的活性明显下降.可以认为78、96与101位半胱氨酸的游离巯基同时参与了天然hbFGF多聚体的形成,是导致野生型hbFGF可溶性与稳定性较低的主要原因,Cys101还与维持hbFGF的活性直接有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	潘秋辉	中山大学附属第二医院林百欣医学研究中心	27	121	6.0	9.0
2	洪岸	暨南大学生物工程研究所	107	856	14.0	25.0
3	孙奋勇	暨南大学生物工程研究所	67	545	11.0	20.0
4	谢秋玲	暨南大学生物工程研究所	60	665	13.0	24.0
5	余榕捷	暨南大学生物工程研究所	37	174	6.0	12.0