应用PCR-RFLP技术检测中枢神经系统感染患儿6种疱疹类病毒DNA的实验研究

• 作者: 余钟声 俞锡林 尚世强 董关萍
• 来源期刊: 中国实用儿科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 疱疹类病毒 限制性酶切图谱 中枢神经系统 诊断
• 年，卷（期）: 2004,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 611-613
• 页数: 3页
• 分类号: R72
• 字数: 3039字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-2224.2004.10.012

摘要

目的建立一种能快速区分6种疱疹类病毒DNA特异的限制性内切酶图谱.方法 2002年1～12月浙江大学儿童医院在疱疹类病毒高度同源序列DNA多聚酶基因中设计两对通用引物,该引物能同时扩增单纯疱疹病毒Ⅰ型与Ⅱ型(HSVI/HSVⅡ)、爱泼斯坦-马尔病毒(EBV)、人巨细胞病毒(CMV)、水痘-带状疱疹病毒(VZV)和人类疱疹病毒6型(HHV6)6种病毒.选择BstUI内切酶对PCR产物进行酶切.98例怀疑病毒性脑炎、脑膜炎患儿的脑脊液标本用PCR-RFLP和ELISA法进行检测.结果 6种标准病毒株PCR扩增后产物为510～592bp,经酶切后能区分为何种病毒,其最小检出量为0.1fg,与乙肝病毒、真菌、细菌和人类基因组无交叉反应.用该方法检测临床98份脑脊液标本中的疱疹类病毒,13份阳性,同时用ELISA法检测该标本,5例阳性.PCR阳性检出率为13.3%,ELISA为5.09%(P<0.05).2例患儿在院外阿昔洛韦已治疗2～3d,但入院后在其脑脊液中仍能检测到病毒DNA.10例诊断为疱疹病毒感染患儿经更昔洛韦每天10mg/kg,分两次静脉注射治疗14d后,8例临床症状明显好转,2例病情未见好转.结论建立的疱疹类病毒特异的限制性内切酶图谱具有特异敏感,快速准确的特点,且不受抗病毒药物的影响,为中枢神经系统疱疹类病毒感染的早期诊断提供了有效手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余钟声		28	114	6.0	9.0
2	董关萍		48	179	8.0	10.0
3	俞锡林		17	112	7.0	9.0
4	尚世强		106	875	14.0	26.0