O-GlcNAc糖基转移酶在原核和真核细胞中的表达和提纯

• 作者: 刘飞 金淑仪 钱慰 龚成新
• 来源期刊: 南通医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 蛋白质O-GlcNAc糖基化修饰 O-GlcNAc糖基转移酶 大肠杆菌表达 昆虫细胞表达
• 年，卷（期）: 2004,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1-4
• 页数: 4页
• 分类号: R555+.4
• 字数: 4708字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7887.2004.01.001

摘要

目的:本文为进一步研究蛋白O-GlcNAc糖基化修饰提供重要资源.方法:为了探索制备纯化具有生物学活性的重组OGT的有效方法,本文用大肠杆菌和Hi5昆虫细胞表达并纯化具有活性的重组 OGT.携带人OGT cDNA的PET32a质粒在大肠杆菌中表达出带有1个S-Tag的重组人OGT融合蛋白,然后用与S-蛋白质偶联的琼脂糖凝胶颗粒从细菌裂解液中亲和纯化OGT融合蛋白.结果:其纯化的OGT在电泳中显现单一条带并具有生物活性,但其活性在洗脱后丧失.在Hi5昆虫细胞中表达的鼠肝OGT带有一His6tag,经镍离子螯合柱纯化后,其比活性达到0.88 nmol·min-1·mg-1 OGT.结论:在这两个表达系统中制备重组OGT各有利弊.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	金淑仪	南通医学院生物化学教研室	19	148	8.0	11.0
2	钱慰	南通医学院生物化学教研室	3	2	1.0	1.0
3	刘飞	美国纽约州立基础研究所神经生化系	1	1	1.0	1.0
4	龚成新	美国纽约州立基础研究所神经生化系	2	2	1.0	1.0