N端融合不同长度转位肽的重组粒酶B抑制细胞生长作用的比较

• 作者: 于翠娟 张莉 曹云新 杨安钢 王成济 王智 赵晶
• 来源期刊: 生物工程学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 粒酶B 绿脓杆菌外毒素 诱导表达 生长抑制作用
• 年，卷（期）: 2004,（4）
• 所属期刊栏目: 基因工程
• 页码范围: 501-506
• 页数: 6页
• 分类号: Q255
• 字数: 4342字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3061.2004.04.006

摘要

采用重组PCR法将粒酶B基因的N端信号肽和酸性二肽编码序列去除,与两种不同长度的绿脓杆菌外毒素(PE)转位肽序列分别连接,将它们插入pIND诱导表达载体,通过脂质体法与pVgRXR辅助质粒共转染HeLa细胞,建立了重组PE II-GrBa基因的诱导表达细胞系.松甾酮A诱导后Western印迹检测到目的基因的表达,间接免疫荧光观察到表达细胞出现多核巨细胞的异常形态.两种表达的PE II-GrBa融合蛋白均能够切割粒酶B的细胞内源性和外源性底物,并且使细胞生长速度减慢.其中,PE II (aa 280-358)-GrBa的底物切割能力和生长抑制作用较强.流式细胞仪分析这种抑制作用可能与细胞周期的G2期受到阻遏有关.上述结果证实了PE II-GrBa融合蛋白仍然具有抑制细胞生长的作用,并且较短的转位肽对GrBa活性的影响较小,有助于进一步优化转位肽/细胞毒性效应蛋白重组分子的结构用于肿瘤细胞杀伤.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曹云新	第四军医大学免疫学教研室	108	741	14.0	21.0
2	张莉	第四军医大学生物化学与分子生物学教研室	77	886	17.0	24.0
3	赵晶	第四军医大学生物化学与分子生物学教研室	44	146	6.0	10.0
4	王成济	第四军医大学生物化学与分子生物学教研室	56	326	8.0	15.0
5	杨安钢	第四军医大学免疫学教研室	147	801	14.0	21.0
6	王智	第四军医大学生物化学与分子生物学教研室	21	51	5.0	6.0
7	于翠娟	第四军医大学免疫学教研室	17	132	5.0	11.0