赖型钩端螺旋体毒力相关蛋白InvA的表达及其促细胞增殖效应

• 作者: 吴悦涵 张会东 朱庆平 赵明才 赵计林 鲍朗 龙洋
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: InvA 钩体致病相关蛋白 细胞增殖 ANA-1细胞
• 年，卷（期）: 2004,（11）
• 所属期刊栏目: 细菌学
• 页码范围: 866-869
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 3398字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.2004.11.008

摘要

目的在大肠杆菌中表达赖型钩端螺旋体毒力相关蛋白InvA,并观察该蛋白对ANA-1细胞的增殖作用. 方法将invA基因克隆于pET32a(+)载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达带组氨酸标签的Trx-InvA融合蛋白,经亲和层析获得纯化Trx-InvA蛋白.以不同浓度的Trx-InvA融合蛋白作用于ANA-1细胞,以四氮唑复合物[2,3-bis(2-methoxy-4-nitro-sulfophenyl)-5-[(Phenylamino)carbonyl]-2H-tetrazoium hydrixide,XTT]法检测细胞增殖的变化,分析InvA蛋白的细胞功能. 结果成功构建pETINVA原核表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达了相对分子质量(Mr)约为35×103的Trx-InvA融合蛋白,该蛋白能促进ANA-1细胞的增殖. 结论表达并纯化的Trx-InvA融合蛋白具有促进细胞增殖的作用.