插入T-DNA片段构建部分水稻突变体株系

• 作者: 任波 瞿礼嘉 程英豪 薛绍白 郑文明 陈章良 顾红雅
• 来源期刊: 中国农业科学
• 关键词: 水稻 土壤农杆菌 T-DNA标签 突变体 除草剂抗性
• 年，卷（期）: 2004,（3）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种·种质资源
• 页码范围: 313-321
• 页数: 9页
• 字数: 7075字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0578-1752.2004.03.001

摘要

通过农杆菌Agrobacterium tumefaciens介导,将T-DNA片段高效插入水稻中花11的基因组DNA中.利用二次枝梗种子和未成熟种子的盾片愈伤组织作为转化起始物,探索并优化了影响愈伤组织诱导率、再生率和转化率的试验条件,得到近1 0 000株转化植株.经PcR分析和Southern杂交证明已将外源基因整合到水稻基因组中.当代转基因植株可抗0.2%的除草剂Basta.200余棵T0代转化株系出现白化苗、宽叶、狭叶、黄叶、高秆、矮化并杂草化、不育、白化穗.皱穗和抽穗延迟等突变表型,结实率普遍较低.对3个转基因水稻突变株的子代进行bar基因分析发现,bar基因在子代中呈现3:1的分离规律.试验中发现了转基因子代的突变征状的分离与bar基因的分离相一致现象.对具有突变征状的转基因水稻植株进行T-DNA边序分析发现这些突变很可能与T-DNA插入有关.