粉尘螨Ⅱ类抗原(Der f 2)的cDNA克隆测序及亚克隆

• 作者: 李朝品 杨庆贵
• 来源期刊: 中国人兽共患病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 粉尘螨 抗原 cDNA 序列分析
• 年，卷（期）: 2004,（7）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 630-632,648
• 页数: 4页
• 分类号: R384.4
• 字数: 2810字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2004.07.021

摘要

目的获得粉尘螨Der f 2 cDNA克隆及亚克隆,并进行测序.方法设计合成引物,从粉尘螨螨体中提取RNA,经RT-PCR获得cDNA,PCR扩增目的片段经纯化回收后克隆至pMD-18T,转化大肠杆菌E.coli JM109,经PCR初筛挑选阳性克隆并测序,将PCR筛检阳性重组子及pET-32a(+)表达载体分别用SacⅠ和NotⅠ双酶切,连接转化至E.coli Competent Cell JM 109中过夜培养,挑选菌落进行酶切鉴定.结果从粉尘螨基因组RNA中扩增出Der f 2 cDNA片段,成功构建pET-32a(+)-Der f 2亚克隆,酶切产物的大小与预期相符.结论成功地对粉尘螨Der f 2 cDNA进行体外扩增并构建pET-32a(+)-Der f 2亚克隆.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李朝品	安徽理工大学医学院	241	1563	18.0	28.0
2	杨庆贵	安徽理工大学医学院	28	261	10.0	14.0