SV40LT抗原基因逆转录病毒载体的构建及其在肝细胞中的表达

• 作者: 劳学军 孙维佳 张翼 张阳德
• 来源期刊: 中国普通外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝细胞/遗传学 SV40LT抗原基因
• 年，卷（期）: 2004,（8）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 587-590
• 页数: 4页
• 分类号: R735.7
• 字数: 2601字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-6947.2004.08.008

摘要

目的构建含SV40u抗原基因的逆转录病毒载体并转染鼠肝细胞,检测SV40LT抗原基因在肝细胞中的表达情况,为肝细胞移植研究打下基础.方法利用体外基因重组技术构建含SV40LT抗原基因的逆转录病毒载体并酶切、测序鉴定,脂质体介导转染PA317细胞,G418抗性筛选阳性克隆,通过MH3T3细胞测定病毒滴度;分离、纯化大鼠肝细胞后,将含SV40LT抗原基因的假病毒颗粒感染肝细胞,用PCR及免疫组化法检测转染肝细胞中SV40LT抗原基因的表达情况.结果(1)酶切分析、测序证明重组逆转录病毒载体含有SV40LT抗原基因;(2)病毒滴度为1.3×106cfu/ml;(3)转染后的肝细胞含有SV40LT抗原基因,其表达在转染后24h明显高于96h(P＜0.05).结论成功构建含SV40LT抗原基因的逆转录病毒载体,转染后的肝细胞表达有目的基因,有望作为肝细胞体外培养的可用技术.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张阳德	中南大学湘雅医院肝胆肠外科研究中心	556	4187	26.0	40.0
2	孙维佳	中南大学湘雅医院普外科	69	396	9.0	16.0
3	张翼	中南大学湘雅医院普外科	54	406	11.0	17.0
4	劳学军	中南大学湘雅医院普外科	4	12	2.0	3.0