肝细胞永生化逆转录病毒载体pLTSN的构建

• 作者: 李俊刚 王宇明 陈耀凯
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: SV40 聚合酶链反应 重组 菌落
• 年，卷（期）: 2005,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1796-1798,1802
• 页数: 4页
• 分类号: R446.61|G784
• 字数: 2401字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8982.2005.12.010

摘要

目的构建含猿猴病毒40大T抗原基因(SV40T)的逆转录病毒永生化载体pLTSN,为肝细胞永生化奠定基础.方法以质粒pUC19-SV40T为模板,高保真PCR扩增SV40T,双粘端连接法将其克隆到pLXSN的EcoRⅠ和BamHⅠ位点之间,通过菌落PCR和酶切法筛选、鉴定阳性克隆并经测序验证.结果用菌落PCR和酶切法随机筛选的10个菌落中9个为阳性,阳性克隆经质粒DNA测序分析确证.结论成功构建了逆转录病毒永生化载体pLTSN.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈耀凯	第三军医大学西南医院全军感染病研究所	48	477	11.0	20.0
2	王宇明	第三军医大学西南医院全军感染病研究所	299	2460	25.0	35.0
3	李俊刚	第三军医大学西南医院全军感染病研究所	17	85	5.0	8.0