抗肝癌人源化单链抗体hscFv25的体外亲和力成熟

• 作者: 俞炜源 孙志伟 杜威世 王双
• 来源期刊: 世界华人消化杂志
• 学科: 医学
• 年，卷（期）: 2004,（11）
• 所属期刊栏目: 肝癌
• 页码范围: 2568-2571
• 页数: 4页
• 分类号: R73
• 字数: 4871字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-3079.2004.11.013

摘要

目的:提高人源化抗肝癌单链抗体hscFv25的亲和力.方法:设计并合成人源化抗肝癌单链抗体hscFv25重链及轻链CDR3的半随机突变引物,构建突变体抗体库,竞争筛选亲和力更高的突变体抗体,对所得到的高亲和力的候选抗体,在大肠杆菌中进行可溶性表达,并采用细胞ELISA、细胞涂片免疫组织化学染色的方法,对该抗体进行初步的活性鉴定.结果:得到了3株候选高亲和力突变体抗体,其中的一株在大肠杆菌中获得了可溶性表达后,进一步的活性检测结果表明,该抗体的相对亲和力比亲本单链抗体提高了60倍左右,同时该抗体对肝癌细胞(SMMC-7721)的免疫组织化学染色呈强阳性,着色情况与亲本抗体相一致,而对正常肝细胞(HL-02)染色呈阴性.结论:成功地构建了人源化抗肝癌单链抗体hscFv25的突变体抗体库,并筛选到了一株亲和力更高的突变体抗体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王双	军事医学科学院生物工程研究所	31	134	5.0	11.0
2	俞炜源	军事医学科学院生物工程研究所	87	518	11.0	17.0
3	孙志伟	军事医学科学院生物工程研究所	68	390	10.0	16.0
4	杜威世	军事医学科学院生物工程研究所	5	14	2.0	3.0