柿AFLP银染技术体系的建立

• 作者: 崔惠英 张志华 张桂霞 王文江
• 来源期刊: 河北农业大学学报
• 关键词: 柿 AFLP 银染技术体系
• 年，卷（期）: 2005,（2）
• 页码范围: 9-14
• 页数: 6页
• 分类号: S665.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1573.2005.02.003

摘要

通过对各主要影响因素的研究,建立了适于柿AFLP分析的银染技术体系:酶切体系20 μL总体积中含纯化后的DNA 450 ng,EcoR I 和Mse I各 3 U,37℃酶切 4 h;酶切完成后加入连接液,37℃连接10 h(或过夜),然后65℃变性10 min;连接产物稀释5倍用于预扩增,预扩增体系中EcoR I 和Mse I引物均不含选择性碱基;预扩增产物稀释5倍用于选择性扩增,选择性扩增体系中EcoR I 和Mse I引物均含3个选择性碱基,选择性扩增完成后,加入10 μL Loading buffer,95℃变性10 min,立即冰浴;取6.5 μL变性后的选择性扩增产物在6%变性聚丙烯酰胺凝胶上电泳,电泳完毕后,对胶板进行固定、脱色、水洗、银染、冲洗、显影、定影及干燥等银染程序.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	崔惠英		20	67	6.0	8.0
2	张志华	河北农业大学山区研究所	61	1293	22.0	34.0
3	王文江	河北农业大学山区研究所	20	412	12.0	20.0
4	张桂霞	天津农学院园艺系	32	186	9.0	12.0